Introduksi Gen SOD (Superoxide Dismutase) pada Tanaman Tembakau (Nicotiana tabacum) dengan Metode Infiltrasi dan Agrobacterium

Abstrak

Transformasi tanaman adalah proses penyisipan DNA dari satu tanaman ke tanaman lain. Transformasi diperlukan untuk mengembangkan karakter tanaman menjadi tahan terhadap cekaman abiotik dan serangan patogen. Proses transformasi tanaman dapat dilakukan dengan metode infiltrasi dan Agrobacterium. Metode infiltrasi digunakan pada organ daun tanaman.
Agrobacterium digunakan sebagai media transformasi karena mengandung T-DNA yang berintergrasi dengan DNA tanaman. Metode infiltrasi dan Agrobacterium diekspresimenkan pada tanaman tembakau. Karena tanaman tembakau mudah ditransformasi dan dapat memperbaiki sifat agronomi. Namun, transformasi tanaman tembakau menggunakan metode
infiltrasi dan Agrobacterium belum diteliti dengan introduksi gen SOD. Sehingga, Tujuan penelitian ini dilakukan untuk mengintroduksi gen SOD pada tanaman tembakau dan mengisolasi DNA transgenik putatif sebagai konfirmasi keberhasilan introduksi dan transformasi tanaman. Metode penelitian yang digunakan adalah infiltrasi dengan Agrobacterium sebagai media introduksi gen SOD pada tanaman tembakau. Transformasi tanaman dilakukan dengan pelukaan organ daun. Organ daun direndam dengan larutan berisi Agrobacterium dan diaduk selama 20 menit. Organ daun ditumbuhkan secara kultur jaringan
dengan media seleksi berupa MS dan antibiotik hingga menjadi tanaman utuh. Isolasi DNA transgenik putatif dilakukan pada daun tanaman dan amplifikasi gen SOD dengan PCR. Hasil penelitian menunjukkan gen SOD berhasil terintroduksi dan terjadi transformasi pada tanaman tembakau. Keberhasilan ini diperoleh dari jaringan daun yang tumbuh menjadi tanaman utuh. Tanaman utuh membawa gen SOD diindikasikan dengan muncul pita setelah amplifikasi PCR. Transformasi dengan gen SOD dapat meningkatkan ketahanan tanaman tembakau terhadap cekaman oksidatif.